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时间:2024-09-05 点击数:
11月11日晚上8点左右,CellResearch杂志以LettertoEditor形式在线公开发表了来自南通大学和复旦大学研究人员合作已完成(该文通讯作者刘东博士和作者之一复旦大学王永明研究员)为题“NgAgo-basedfabp11ageneknockdowncauseseyedevelopmentaldefectsinzebrafish”的论文(右图),该文结果表明gDNA/NgAgo系统在斑马鱼中能构建特定基因敲低造成鱼眼部发育缺失,但是无法对靶基因展开基因编辑。 这篇文章中作者的研究的靶基因取名为Fabp11a(Fattyacidbindingprotein11a,脂肪酸融合蛋白11a),该基因在参予调停葡萄糖和脂代谢稳态方面具备最重要起到,但是在斑马鱼胚胎发育中该基因的功能不得而知。回应,作者想要告诉NgAgo系统否能在斑马鱼中工作,针对Fabp11a基因设计了两条5-磷酸化的ssDNA(右图1),与优化过的NgAgo-2nlsmRNA一起静脉注射到1细胞期的胚胎中,有意思的是他们仔细观察到静脉注射过的胚胎中最后大约有30%不会产生相当严重的眼部发育表型。第一类表型:眼部有一只比较小一点的眼睛而另一只变得十分小;第二类表型:两只眼睛融合构成一只较小的眼睛(闻右图2)。
图一 图二 为了证明否斑马鱼经常出现的表型是由于Fabp11a基因遗传变异导致的,作者抽提了长时间斑马鱼胚胎和变异斑马鱼胚胎的DNA对靶基因展开PCR扩充,结果测序结果表明靶基因没再次发生任何基因突变,但是通过RT-PCR检测Fabp11a基因的传达惊讶的找到该基因的传达有明显敲低(闻右图E)。
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